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| [/color][color=red]大家好： Bcl-2的表达和Bax的表达究竟是怎样一种关系？我的课题的主线是神经保护，给了干预措施后，Western 结果显示Bcl-2和Bax 的表达都是先升高后降低，趋势基本一致，如何进行合理的解释？请各位大侠指点：）自己顶问一下你做什么细胞什么模型，给损伤了么，损伤后两者是怎么变化的？本人对这方面不是很了解，据说Bcl-2是神经元损伤的标志，而Bax是神经元被保护的标志！两个因素之间好像彼此消长的关系！Bcl-2与Bax共属于一个家族，通过控制线粒体膜的通透性来调节凋亡激活物 如细胞色素c的释放来影响细胞的状态。bax二聚体在膜上打开通道，增加通 透性；bcl－2与bax形成异聚体，降低通透性。 所以，bcl－2水平的升高和bax的降低表明细胞对凋亡的抵抗性增强，应该是 保护药物起作用的标志；而反之则相反。 现在你作出来的变化既然一致，那你可以试试计算bcl－2/bax的比值，比值 越大，说明抗凋亡能力越强。 如果连比值都没有意义，只能说你的药没有保护作用或者其作用的靶点不在 bcl－2和bax上。可以尝试其它凋亡环节上。 你好，我的毕业论文就是作这个的。有些看法！现在节选了我文章中的一些文字！首先，比较明确的是细胞凋亡可以通过两种途径被介导：线粒体凋亡途径和死亡受体(Fas-FasL)介导的途径。这其中细胞色素C的释放是一个十分重要的事件。许多学者认为线粒体细胞色素C的释放是通过通透性转变气孔（PTP），而Bcl-2家族蛋白直接调节PTP。在这些蛋白中，抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-Xl能够保存膜电位，阻断细胞色素C的释放。而Bax、Bcl-Xs、Bak、Bid和Bad是前凋亡蛋白。它们通过影响PTP而消除了线粒体的膜电位，促进细胞色素C的释放。线粒体渗透性转变孔道复合物（PTPC）是一种大分子的多蛋白复合体，包括许多组件。据认为大多数的PTPC组件主要有电压依从性阴离子通道（VDAC），一种外膜蛋白；腺嘌呤核苷酸易位体（ANT），定位在内膜；胞溶质蛋白D（CypD），定位在基质。而Bax能作用于ANT或VDAC，迅速开放孔道。有实验表明敲除了ANT的酵母对Bax诱导的细胞死亡有较大的耐受，这表明ANT可能是Bax的一个功能作用点。Bax和Bak能直接作用并打开脂质体中的VDAC，并诱导膜电位的改变。发挥该作用的Bax必须是低聚物，而不是单体形态。Bax的低聚物能在外膜插入并形成通道，足以释放细胞色素C。单体的Bax不能刺激细胞色素C的释放，这表明在Bax插入膜之间需要经过寡聚化作用。该过程可由tBid介导。总的来说，Bcl-2和Bax是相互对立的一对基因。如果变化趋势一致，那么两者比值就比较有意义。如果Bcl-2/Bax的值在用药后逐步增加，那说明你的药还是有一定的作用，反之，无用！这里需要说明的是，Bax要介导凋亡必须经过寡聚化作用。因此如果只用western blot测定表达量，严格的说不具有说服力，还需要对Bax的构型进行研究。Because the regulation of Bax on cell apoptosis doesn’t depend on its expression, but chiefly depends on its intracellular translocation (Wolter KG et al.,1997) and oligomerization (Vladimir Gogvadze et al., 2001). 你的报道最好要研究treatment can reduce the dimers of Bax, thereby alleviate neuronal apoptosis. 这样才有意义！另外，还有一点，我在投sci时，专家问我为什么不选caspase来做，我感觉他们的意思是说Bcl-2和Bax好像是一对比较老的基因，研究的也差不多了，应该选其他的来做。我想你还作这个可能不好发文章，没什么新意！真的。另外，还有一点，我在投sci时，专家问我为什么不选caspase来做，我感觉他们的意思是说Bcl-2和Bax好像是一对比较老的基因，研究的也差不多了，应该选其他的来做。我想你还作这个可能不好发文章，没什么新意！真的。 说说我对老外意见的理解。凋忘通过现在认为有2条：依赖caspase通路和非依赖caspase通路的。而在caspase通路中caspase3是执行功能的，而Bcl-2和Bax是上游信号，如果它发生变化，也是间接说明问题，即可能会发生凋忘，也有可能信号在下传的过程中被抑制住了，没有发生凋忘。所以我觉得作凋忘做caspase3是比较好的。另外做实验只要说明问题就行，我想老外的意思应该不是说Bcl-2和Bax好像是一对比较老的基因，而是认为做caspase更能说明问题。 拙见，说的不对的地方请批评。 |
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