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2024-06-02 05:36:10| 来源: 网络整理| 查看: 265

D-PBS缓冲液(不含钙镁和酚红)

PBS缓冲液的作用

1.PBS是磷酸缓冲盐溶液的简称,不仅伪狂犬病毒要用它稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用,蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在适条件下参与生物反应,所以使用PBS是*。

PBS也不是的,有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高,就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分,维持佳的条件保证生物活性物质保持其完整的特性。

2.PBS缓冲液能保持组织细胞需要的PH范围.第二,其中所含的盐浓度与体内环境的相似,对组织细胞没有毒性作用.用PBS洗细胞就是去掉培养基及其中所含的影响实验结果的成分.PBS对试验结果没有影响.当然对细胞也无毒害.

D-PBS缓冲液(不含钙镁和酚红)​

PBS缓冲液的配制:

方法一:

含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:

1.称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),(NaCl),(KCl),吐温-20 ,加水;

2.PBS:Phosphate Buffered Saline;

3.PBS 1L配方pH7.4:磷酸二氢钾(KH2PO4):0.27g;

4.磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.42g;

5.(NaCl):8g;

6.(KCl)0.2g;

7.加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH7.4,后定容到1L;

方法二:

母液的配制:

0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水

0.2M NaH2PO4:称取 2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水

各种浓度

PB(pH=7.4)的配制:

先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。

然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如: 0.1M PB(PH=7.4) :

取 500ml 0.2M PB,加水稀释1000ml 即可。如:

0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释 1000ml 即可。

0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释 1000ml 即可。

若需要 NaCl的话,加入 NaCl 0.9%(g/100ml)即可。

方法三:PBS缓冲液

称取8g  NaC1、0.2g  KCI、1.44g  Na2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值7.4,加水定容1L,常温保存备用。

另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方 :

pH       0.2M NaH2PO4(ml)         0.2M Na2HPO4(ml)5.7             93.5                          6.55.8             92                             8 5.9             90                             106.0             87.7                          12.36.1             85                             156.2             81.5                          18.56.3             77.5                          22.56.4             73.5                          26.56.5             68.5                          31.56.6             62.5                          37.56.7             56.5                          43.56.8             51                            496.9              45                           557.0              38                           627.1              33                           677.2             28                            727.3              23                           777.4              19ml                         81ml7.5              16                           847.6              13                           877.7             10.5                          0.57.8              8.5                          91.57.9             7                              93

8.0             5.3                           94.7

 

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