产品编号：C001391

品系背景：C57BL/6J

传代方案：阳性与阳性互配

主要表达部位：脑部小胶质细胞等

品系描述

CX3C趋化因子受体1（C-X3-C motif chemokine receptor 1, CX3CR1）基因编码的CX3CR1是一种G蛋白偶联受体，它的功能主要是识别和结合CX3CL1趋化因子蛋白，除参与免疫细胞在炎症反应中迁移的调节和神经元的迁移和突触形成调控外，CX3CR1-CX3CL1信号通路在许多生理和病理过程中都扮演着重要角色。CX3CR1的异常与多种疾病有关，例如炎症性疾病、癌症、神经系统疾病等，因此，CX3CR1-CX3CL1信号通路被广泛用于研究免疫系统和神经系统的生物学过程以及相关疾病的发病机制。CX3CR1主要在免疫系统和神经系统中表达，尤其是在单核巨噬细胞表面和小胶质细胞中，同时也在单核细胞、循环T细胞亚群和自然杀伤细胞以及树突状细胞中表达[1]。

Cx3cr1-iCre小鼠利用基因编辑技术构建，用改进后的Cre重组酶（improved Cre, iCre）表达元件替换小鼠内源性Cx3cr1基因的CDS区域，Cre重组酶的表达模式与内源基因的相似。当该品系小鼠与含有loxP位点的小鼠杂交后，可在子代小鼠的脑部小胶质细胞和其它部位的巨噬细胞中发生由Cre重组酶介导的loxP位点间的序列重组。

构建方式

小鼠Cx3cr1基因起始和终止密码子皆位于Exon 2，通过基因编辑将Exon 2替换为iCre重组酶表达元件。

验证数据

将Cx3cr1-iCre小鼠与Rosa26-LSL-tdTomato小鼠交配，产生双基因杂合子代小鼠，Cre酶介导的重组将导致tdTomato蛋白在子代Cre阳性细胞中表达。分别采集7周龄子代小鼠的脑、皮肤、肝、肾、肠、脾和肺组织等组织，通过免疫荧光染色观察Cre重组酶的表达情况。

实验组（Cre+）：Cx3cr1-iCre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]

对照组（Cre-）：Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/CKI]

图1. 脑部组织免疫荧光染色。Cre+（Cx3cr1-iCre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）小鼠在脑部组织中存在大量的tdTomato蛋白红色荧光，其表达与小胶质细胞标记物IBA1的表达的存在共定位，表明在脑部小胶质细胞中存在大量的Cre重组酶表达，而对照组（Cre-）小鼠中检测不到tdTomato红色荧光的表达，不存在Cre重组酶的表达。

图2. 皮肤组织免疫荧光染色。Cre+（Cx3cr1-iCre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）小鼠在皮肤组织中存在大量的tdTomato蛋白红色荧光，表明在该部位存在大量的Cre重组酶表达，表达的细胞可能是巨噬细胞。而对照组（Cre-）中的红色荧光是由于Rosa26-LSL-tdTomato品系小鼠自身的泄漏造成的（内部数据显示Rosa26-LSL-tdTomato小鼠有几率在皮肤出现轻微泄漏，但在其它部位并不存在泄漏）。

图3. 肺、肾、肝和肠道免疫荧光染色。Cre+小鼠在肺部、肾脏、肝脏和肠道的部分组织中存在tdTomato蛋白红色荧光，表明在这些部位存在Cre重组酶表达，表达的细胞可能为巨噬细胞。而对照组（Cre-）小鼠中检测不到tdTomato红色荧光的表达，不存在Cre重组酶的表达。

图4. 脾脏免疫荧光染色。Cre+小鼠在脾脏中存在少量的tdTomato蛋白红色荧光，表明在脾脏中Cre重组酶表达较低。而对照组（Cre-）小鼠中检测不到tdTomato红色荧光的表达，不存在Cre重组酶的表达。

Cx3cr1-iCre小鼠模型中Cre重组酶的表达主要定位于脑组织小胶质细胞中，也可以在肠道、肺部、肝脏和皮肤的部分部位检测到Cre重组酶介导的重组，这些发生重组的细胞可能是巨噬细胞，此外，在脾脏中也存在少量的重组信号。综上所述，该模型可作为小胶质细胞及其他组织巨噬细胞类型工具鼠使用。

注意事项

该模型Cre重组酶表达元件插入位点位于9号染色体，请避免使用与Cre工具鼠同条染色体上打靶的基因编辑小鼠进行配繁。

参考文献