电针治疗CFA诱导的炎性痛机制研究

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作者：

骆利敏

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摘要：

目的:1,探讨电针刺激诱导脊髓homer1a的表达及其抗伤害性效应的机制;2,探讨CFA诱导的炎性痛机制以及homer1a,mGluR5-homer及IP3R-homer复合体在其中的作用,进一步探究电针治疗CFA诱导的炎性痛分子生物学基础.方法:1,实验一:①将WT小鼠随机分为2组:假电针组(sham组)和电针组(EA组),检测两组小鼠脊髓homer1a的表达情况;②分组为:WT组,H1aKO组,对两组小鼠进行30分钟电针刺激,用纤维丝测痛仪分别测定电针刺激前后小鼠右侧PWT以评估其机械痛阈的变化;利用western blot及免疫共沉淀COIP技术检测两组小鼠脊髓mGluR5-homer和IP3R-homer复合体的基础水平;2,实验二:将WT小鼠随机分为4组:生理盐水组(NS组),炎性痛模型组(CFA组),电针组(EA组),假电针组(sham组),慢性炎性痛模型采用右侧足底皮下注射20μl 80%的CFA,电针及假电针刺激在CFA注射的同侧后肢进行;Von Frey法检测小鼠右侧足底PWT,观察其慢性机械痛觉过敏的形成;用Hargreaves试验检测小鼠右后肢缩爪潜伏期以评估热痛敏感性;利用western blot及COIP检测各组脊髓水平homer1a的表达情况,mGluR5-homer复合体及IP3R-homer复合体的变化情况;使用在体电生理技术进一步证实电针通过诱导homer1a表达调节mGluR5信号发挥对CFA诱导炎性痛模型的镇痛效应.结果:1,与sham组相比,EA组脊髓homer1a的表达明显增多(p0.05);WT小鼠在电针后右后肢机械痛阈明显升高(p0.05),而H1aKO小鼠右后肢机械痛阈在电针前后无明显变化(p0.05);与WT组相比,H1a KO小鼠脊髓mGluR5-homer复合体及IP3R-homer复合体形成增加(p0.05);2,与NS组相比,CFA组小鼠右后肢缩爪阈值,缩爪潜伏期,%MPE,%?-threshold明显降低(p0.05);给予电针治疗后,EA组相较于CFA组,右后肢缩爪阈值,%MPE,%?-threshold均增加(p0.05);与生理盐水组相比,CFA组脊髓中mGluR5-homer复合体及IP3R-homer复合体形成增加(p0.05),与CFA组相比,EA组脊髓homer1a表达明显增多,mGluR5-homer复合体及IP3R-homer复合体形成减少(p0.05);电生理结果显示,CFA引起了中枢敏化产生痛觉过敏,电针可以抑制CFA动物模型中TSS引起的脊髓背角C纤维突触可塑性的增强,电针抑制LTP的这种效应在H1aKO小鼠上明显减弱;结论:1,电针刺激可诱导脊髓homer1a表达介导其抗伤害性效应;2,电针通过诱导脊髓homer1a表达,从而解聚mGluR5-homer复合体及IP3R-homer复合体发挥对CFA致慢性炎性痛的镇痛作用.

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