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如何做好耐糖实验?满满干货看这里!

2024-04-21 23:56| 来源: 网络整理| 查看: 265

我们在用小鼠做糖尿病相关研究的时候,通常会涉及到做小鼠葡萄糖耐受试验(GTT)和胰岛素耐受试验(ITT),但有时候我们在实验时候会遇到各种问题,对于注射剂量、注射方式选择以及检测时间点等把控不准,从而倒置实验结果不理想。今天小编就带你了解一下!

Q1:做小鼠葡萄糖耐受试验(GTT)和胰岛素耐受试验(ITT),一般小鼠需要禁食多久? A1:对于小鼠而言,一般禁食的时间相关文献的报道都是控制在4-8小时范围,可以根据自身实际情况进行设计。集萃药康在用BKS-DB等小鼠做糖耐量实验时一般禁食6小时。

Q2:GTT时葡萄糖注射方式?剂量一般是多少?检测几个时间点?A2:萄糖耐量试验是诊断糖尿病的一种实验室检查方法。主要有静脉和口服两种,前者称IVGTT,后者称OGTT。IVGTT只用于评价葡萄糖利用的临床研究手段,或胃切除后,吸收不良综合症等特殊病人。OGTT则是临床最常见的检查手段。我们在用小鼠做研究时,葡萄糖注射剂量一般选择0.5-2g/kg的范围,在0、15、30、60、90和120min时检测。另外,研究肠道相关降糖激素的分泌可以用OGTT试试。

Q3:ITT时胰岛素的剂量注射剂量为?一般测几个时间点?A3:ITT一般选择范围是0.75-1u/kg,选择1u/kg较多,间隔15min,5-6个时间点,禁食时间参考上面提到的GTT。

了解了糖耐量实验相关的注意点,我们再来了解一下研究糖尿病常用的一些小鼠模型。 集萃药康通过饮食/药物诱导及基因编辑等方式构建了用于II型糖尿病治疗的小鼠模型,可用于疾病机制研究,满足诸多企业临床前测评需求,同时可提供模型构建、代理繁育、药效评价一站式服务。  

C57BL/6JGpt DIO 45% 集萃药康通过45%高脂高糖饲料喂养得到的DIO小鼠表现出体重增加,血糖水平显著升高,血脂(Chol、LDL-C、HDL-C)显著升高,可用于研究肥胖、糖尿病等代谢类疾病。   HFHSD+STZ诱导II型糖尿病模型 HFHSD+STZ诱导的II型糖尿病小鼠模型体重无明显变化,血糖出现明显升高,可用于II型糖尿病研究及治疗药物开发。   BKS-DB 瘦素受体(leptin receptor, Lepr)与肥胖、高血压、糖尿病、脂质代谢紊乱等之间有密切关系。集萃药康采用CRISPR/Cas9技术构建了Lepr基因敲除小鼠。纯合子小鼠的血糖相比野生对照显著增高,胰岛损伤且萎缩,出现重度胰岛素抵抗,可用于II型糖尿病研究。   B6-Alms1-del 人类ALMS1 基因缺失会导致Alström综合征(儿童肥胖、发育迟缓、高血脂症、心肌疾病及Ⅱ型糖尿病等代谢综合征)。集萃药康采用基因编辑技术对鼠源Alms1基因8号外显子特定序列造成11bp碱基缺失,使小鼠Alms1基因提前终止翻译,形成具有肥胖、糖尿病及非酒精性脂肪肝病综合表型的Alms1突变小鼠模型。 BKS-DB是一个经典的糖尿病模型,但很多人在饲养过程中会遇到一些麻烦,那么今天集萃药康小编来给你支支招~~ 由于糖尿病小鼠具有“三多一少”的症状(多饮、多食、多尿、体重下降),在日常饲养中我们必须给予特殊照料,我们需要注意一下几点: SPF级动物设施环境饲养,病原体存在会延迟或阻止糖尿病的发生; 提供足够的食物和水,经常检查以保证足够的供应,确保小鼠能够正常获得水和食物(肥胖小鼠在找食物和水方面更困难); 因为有多尿特征,饲养期间小鼠笼盒较容易潮湿和脏,会对小鼠的健康状况产生影响,建议加大垫料更换频率,一般1~2天更换一次垫料,操作时避免给小鼠压力,减少应激反应; 测随机血糖的最佳时期是在早上(在一晚上很好的休息和饮食之后),且平行实验 测试时间点需要一致; 采用相同的采血方式; 避免小鼠到达后立即开始实验(适应环境非常关键,至少适应1w); 该品系部分小鼠从十二周或更早时期可能会出现并发症,严重时也会有小鼠死亡。如发生死亡,建议及时剖检以明确原因。


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