elisa标准曲线怎么做

摘要

毫无疑问，绘制ELISA标准曲线是科研者在ELISA定量测定中需具备的技能，今天就手把手教你使用Curve Expert软件绘制ELISA标准曲线。

ELISA操作步骤复杂，影响反应因素较多，特别是固相载体的包被难达到各个体之间的一致，因此在定量测定中，每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。

测定大分子量物质的夹心法ELISA，标准曲线的范围一般较宽，曲线最高点的吸光度可接近2.0，绘制时常用半对数纸，以检测物的浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，将各浓度的值逐点连接，所得曲线一般呈S形，其头、尾部曲线趋于平坦，中央较呈直线的部分是最理想的检测区域。

测定小分子量物质常用竞争法，其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。

标准曲线的形状因试剂盒所用模式的差别而略有不同。下面简要介绍使用Curve Expert软件绘制ELISA标准曲线的步骤。

1、标准曲线数据的采集与处理。在Excel中输入标准曲线的数据浓度和吸光度OD值。并进行相应的处理，如减去空白孔OD值、平行组取平均值。

2、打开Curve Expert软件，在表格中填上(复制黏贴也可)Excel中处理好的数据。注意X列一般填吸光度OD值，Y列填标准品的浓度，不要弄反。如下图。

3、数据录入后，点击工具栏上的“Tools”并在下拉菜单中找到“CurveFinder”工具，左键单击。(此步骤用于拟合函数未知的情况，如果拟合函数已知，步骤见后面)