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PBMCs 中的细胞分类与比例
外周血单个核细胞( Peripheral blood mononuclear cell,PBMC) 是外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞、单核细胞和树突状细 胞。目前外周血单个核细胞主要的分离方法是 Ficoll-hypaque (聚蔗 糖-泛影葡胺)密度梯度离心法。
10ml 人外周血大约提取 1*107PBMCs 。
人外周血作为免疫系统来研究时,通常需要通过密度梯度离心去 除红细胞。最常用的是利用 Ficoll Paque 将全血分成高于和低于 1.077g/ml 两种密度的组分。
外周血单个核细胞 (PBMC) 密度较小,位于 Ficoll 上层,也称为 buffy coat 。红细胞和包括中性粒细胞和嗜酸性粒细胞在内的多形核 细胞 (PMNs) 密度大于 1.077g/ml 可被除去。嗜碱性粒细胞的密度在 1.077g/ml 左右,部分仍然存在于 PBMC 组分中。
PBMCs 包括淋巴细胞 (T 细胞、 B 细胞和 NK 细胞 ) 、单核细胞和 DC 细胞。在人类中,这些细胞群的比例在个体中有所差异。通常 PBMCs 中,淋巴细胞占 70-90% ,单核细胞占 10-30% ,而 DC 细胞 则只占 1 -2% 。在淋巴细胞中, CD3+ T 细胞占 70-85%( 在 PBMCs 中 占 45 –
70%) , B 细胞占 5-20%( 在 PBMC 中最多 15%) , NK 细胞占 5-20%( 在 PBMC 中最多 15%) 。
CD3+ T 细胞由 CD4+ T 细胞 ( 在 PBMCs 中占 25-60%) 和 CD8+ T 细胞 ( 在 PBMCs 中占 5-30%) 组成,两者比例在 2 : 1 左右。 CD4+ T 细胞和 CD8+ T 细胞可进一步分为幼稚细胞、抗原接触的中枢记忆细 胞、效应记忆细胞和效应细胞亚群。
CD4+ T 细胞为辅助性 T 细胞,根据特异性细胞因子、表面分子或 |
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