葡萄糖

技术指标

外观：白色无定型冻干粉末；蛋白纯度：≥90%；比活性：≥150 U/mg 酶粉；NADH/NADPH 氧化酶：≤0.1%；己糖激酶：≤0.001%；谷胱甘肽还原酶：≤0.001%；磷酸葡萄糖异构酶 ≤0.001%。

酶学性质

来源：微生物；分类：EC 1.1.1.49；分子量：57 kDa(SDS-PAGE)；等电点：4.6；Km值：3.2×10-4M(NAD+)；2.6×10-4 M(G-6-P)；抑制剂SDS，Zn2+，Fe3+；最适pH 8.0。

最适温度：45℃；pH稳定性 5.5-10.0(25℃,16 h)；热稳定性 40℃以下稳定 (pH 7.5,30 min)；稳定性：-25～-15℃ 静置保存 12 个月保持 90% 以上活性；保护剂：BSA。

用途：用于 CKMB，CK 等试剂的研发和大量配制。

酶活定义

单位酶活定义为在下述反应条件下每分钟生成 1μmol NADH 所需的酶量。

试剂准备

试剂I：55 mM Tris-HCl，pH 7.8，含 3.3 mMMgCl2。

试剂II：60 mM NAD+ 溶液。

试剂III：0.1 M D- 葡萄糖-6-磷酸-二钠。

酶稀释液：5 mM，pH 7.5 Tris HCl，含0.1%BSA。

操作步骤

1.分别取2.7 mL 试剂I、0.1 mL 试剂II 和 0.1mL 试剂III，混匀并在37℃预热5min。

2.加入0.1 mL 待测酶液，混匀。

3.37℃ 反应，用分光光度计在 340 nm 检测样品 1 min 内的吸光度变化（ΔAs）。

*用酶稀释液替换待测酶液，其它步骤相同，记录空白的吸光度变化（ΔAb）ΔA=ΔAs-ΔAb