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如果你研究的蛋白分子量比较大（大于150KD）， 苦于一直跑不出好看的western-blot， 那么这篇文章一定适合你！ 01 选对凝胶很重要 3种最常见的凝胶包括Tris-Glycine, Bis-Tris and Tris-Acetate. Tris-Glycine凝胶的PH为8.6，且保质期很短。在跑胶的过程中，PH还有上升的趋势，可达到9.5。这会导致蛋白降解和低分辨率。Bis-Tris凝胶的PH为6.4，相对Tris-Glycine凝胶，稳定性和保质期都有所增加。但这种凝胶需要在溶液中增加抗氧化剂，比如DTT，以维持蛋白的还原性。Tris-Acetate 凝胶的PH为7，跑大分子蛋白会呈现很高的分辨率。所以跑大分子蛋白时，我们推荐使用Tris-Acetate 凝胶！02 凝胶浓度很重要，可使用梯度凝胶 既然选择了Tris-Acetate 凝胶，还有几个要考虑的问题。 胖友们知道，凝胶浓度与孔径成反比：浓度越小，孔越大。较大的蛋白质更容易通过较大的孔，所以试剂君建议使用低百分比的凝胶 |
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