PBS缓冲液与TBS缓冲液的区别

 PBS缓冲液与TBS缓冲液的区别 在生化实验中，应用最为广泛的缓冲液有PBS缓冲液和用Tris配制的TBS缓冲液。它们的作用都是调节反应体系的pH值，但又有各自的区别。近年来，TBS缓冲液的应用越来越多，有超过磷酸盐缓冲液的趋势。 PBS是磷酸缓冲盐溶液（phosphate buffer saline）一般作为溶剂，起溶解保护试剂的作用。它是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液，主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl，由于Na2HPO4和KH2PO4它们有二级解离，缓冲的pH值范围很广；而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。 Tris缓冲盐溶液简称TBS, 属于常规pH缓冲液，常用于清洗免疫染色的组织或Western Blot 中的蛋白印迹膜等，是常用的分子生物学试剂。TBS缓冲液(0.05mol/L,pH7.4)主要由Tris、氯化钠、BSA、防腐剂等组成，可用于免疫金银染色中清洗组织，亦可作为封闭液的基础试剂。 PBS磷酸缓冲盐溶液具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用，不仅狂犬病毒要用它稀释，一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释，比如稀释血清。原因就是它蒸馏水不具有盐平衡作用，可以破坏生物蛋白的结构及生物特性；生理盐水不具有调整pH的作用，对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应，所以使用PBS是首选。 但是PBS缓冲液也不是万能的，有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高，就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分，维持最佳的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性。 但是，在在有金属离子的溶液体系中，磷酸体系会与常见的Ca离子、Mg离子以及重金属离子缔合生成沉淀。在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中已都使用Tris缓冲液，而很少再用磷酸盐。  

TBS是Tris-HCl缓冲盐溶液（Tris Buffered,Saline）或缓冲生理盐水。配制方法是：先以重蒸水少许溶解NaCl（3.5～9g，0.15mol/L），再加0.5mol/L Tris-HCl缓冲液100mL，最后加重蒸水至1000ml，充分摇匀使Tris终浓度为0.05mol/L。TBS常用于免疫酶技术中漂洗标本，通常还搭配去污剂Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚，一种非离子型表面活性剂）一起使用。

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